GelGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
FS0370-500UL | GelGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料 | 500µl | 520.00 |
核酸凝膠染料(核酸純化與電泳) 核酸凝膠染料(核酸純化與電泳)
產(chǎn)品描述
GelGreen是一種*的油性大分子,不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),不易揮發(fā)升華,人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果也表明GelGreen在凝膠染色濃度下*沒(méi)有誘變性,因此相對(duì)于EB的強(qiáng)致癌性是一種安全無(wú)毒的核酸染料。適用于各種大小片段核酸的電泳染色,對(duì)核酸遷移率的影響遠(yuǎn)小于SYBR Green I。適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠,室溫下在酸或者堿性緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強(qiáng)。
GelGreen適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA、ssDNA以及RNA染色,可以選擇膠染法或泡染法進(jìn)行染色,使用非常方便和靈活。同SYBR Green I的光譜性質(zhì),適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠成像透射儀或可見(jiàn)光凝膠透射儀觀(guān)察。
1)此方法比較節(jié)省染料,500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
2)由于GelGreen 具有良好的熱穩(wěn)定性,可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將GelGreen儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
3)GelGreen兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
4)如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān),請(qǐng)嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長(zhǎng)的凝膠;延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
5)膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
運(yùn)輸與保存方法
室溫運(yùn)輸。4 ºC穩(wěn)定保存12個(gè)月,避免強(qiáng)光直射。
使用方法
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
1 制膠時(shí)加入GelGreen核酸染料(每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL GelGreen 10,000×水溶液,以此類(lèi)推)。
2 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項(xiàng)
二、泡染法(電泳后染色)
1)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2)用H2O將GelGreen 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(如將15μL GelGreen10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3)將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3× 染色液浸沒(méi)凝膠。室溫振蕩染色30min左右,**染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10% 聚丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨聚丙烯酰胺含量增加而延長(zhǎng)。
注意事項(xiàng)
1)用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。
2)3×YeaGreen染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
幾種核酸染料比較:
名稱(chēng) | 靈敏度 | 穩(wěn)定性 | 對(duì)DNA遷移的影響 | 安全性 | 適用性 |
GelRed | 高 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 是一種*的油性大分子,不易揮發(fā)升華,不易吸入人體,不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活體細(xì)胞內(nèi),安全無(wú)毒。 | 通用大小片段電泳染色,與EB有相同的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀(guān)察裝置。標(biāo)準(zhǔn)的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用普通紫外凝膠透射儀觀(guān)察即可,在300nm紫外光附近可得到**激發(fā)。 |
② 艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果表明,GelRed在凝膠染色濃度下*沒(méi)有誘變性,因此*沒(méi)有致癌毒性。 | |||||
GelGreen | 高 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 是一種*的油性大分子,不易揮發(fā)升華,不易吸入人體,不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活體細(xì)胞內(nèi),安全無(wú)毒。 | 通用大小片段電泳染色,適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光凝膠透射儀觀(guān)察。 |
② 艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果表明,DuGreen在凝膠染色濃度下*沒(méi)有誘變性,因此*沒(méi)有致癌毒性。 | |||||
SYBR Green I | 高 | 低 | 染料濃度較高時(shí),條帶容易彎曲,DNA片段遷移的現(xiàn)象明顯 | 屬花箐染料,能透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入活體細(xì)胞內(nèi),但容易生物降解,不會(huì)在體內(nèi)殘留,安全無(wú)毒。 | 100bp以上電泳染色,適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光凝膠透射儀觀(guān)察。 |
EB | 低 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 分子量小,易揮發(fā)升華,易吸入人體,不易生物降解,在體內(nèi)長(zhǎng)期殘留。 | 100bp以上電泳染色,背景熒光信號(hào)高;使用普通紫外凝膠透射儀觀(guān)察。 |
② 艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果表明,EB容易引起有機(jī)體突變,是一種強(qiáng)誘變劑,具有高致癌性。 | |||||
Goldview | 低 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 主要成分為吖啶橙,是一種煤焦油提取物,具有高毒,致癌,高誘變性。 | 100bp以上電泳染色,背景熒光信號(hào)高;適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光凝膠透射儀觀(guān)察。 |
② 易揮發(fā)升華,易吸入人體,能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活體細(xì)胞內(nèi),不易生物降解,在體內(nèi)長(zhǎng)期殘留。 |
特別提醒:
● 如果您使用的是紫外成像儀,請(qǐng)選擇GelRed;如果您使用激光成像儀或希望在可見(jiàn)光下觀(guān)測(cè),請(qǐng)選擇 GelGreen。
● 在極少數(shù)情況下,質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會(huì)出現(xiàn)拖尾和分辨率降低,此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。
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